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細菌內毒素檢查用水的檢查法有以下三種
更新時間:2022-03-02
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細菌內毒素檢查用水
中的細菌內毒素為革藍氏陰性菌及某些陰性菌樣微生物,如立克次體、螺旋體、衣原體細胞壁外膜中的一種脂多糖成分,它往往在細菌生長時釋放或細菌死亡時裂解出來。如果“檢查用水”作為樣品,則《中國藥典》規(guī)定其限值為:0.25EU/ml,而不是你說得10EU/ml;如果你作為“細菌內毒素檢測時的稀釋劑”使用,這是不符合規(guī)定的,<中國藥典>“細菌內毒素檢測法”明確規(guī)定稀釋劑為“細菌內毒素檢查用水”其內毒素含量小于0.015EU/ml(用于凝膠法)。
細菌內毒素檢查法是判斷供試品中細菌內毒素是否符合規(guī)定。細菌內毒素檢查包括兩種方法,即凝膠法和光度測定法,后者包括濁度法和顯色基質法。
1、光度測定法
光度法(包括濁度法和顯色法)可定量檢測內毒素的含量,能較為準確評估產品在生產過程中污染的相對風險,定量檢測的數(shù)據不僅有利于追蹤產品質量趨勢,還能起到風險預警的作用,達到數(shù)據完整性的要求。
光度測定法可通過回收率判斷出干擾的趨勢,尤其對于研究性質的樣品(如新產品)更具有優(yōu)勢。
光度法的檢測范圍比凝膠法寬,使得有干擾的樣品可以有更大的稀釋倍數(shù),對于部分使用凝膠法無法排除干擾的樣品,可以嘗試使用光度法建立細菌內毒素檢測方法。
2、濁度法
濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。根據檢測原理,可分為終點濁度法和動態(tài)濁度法。
動態(tài)濁度法是檢測反應混合物的濁度到達某一預先設定的吸光度或透光率所需要的反應時間,或是檢測濁度增加速度的方法。
3、顯色基質法
顯色基質法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物釋放出呈色團的多少而測定內毒素含量的方法。根據檢測原理,分為終點顯色法和動態(tài)顯色法。
動態(tài)顯色法是檢測反應混合物的吸光度或透光率達到某一預先設定的檢測值所需要的反應時間,或檢測值增加速度的方法。
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